液相色谱的实例应用声讯系统
液相色谱的实例应用
液相色谱的实例应用 2011: 例1.甾族化合物
分析 样品:含孕酮等4种物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,四元梯度
泵,色谱工作站
检测器:MarkⅡA型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为135℃,氮气
流速为1.2L/min。
色谱柱:HyperilC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇:水=70:30
流速:1.2mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在12min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为氢化可的松,峰2为强的松,峰3为睾酮,峰4为孕酮。
例2.皮质醇分析
样品:含皮质醇等5种物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:荧光
检测器,流动池30μL
激发波长370nm,检测波长480nm,狭缝均为20nm
色谱柱:FinepakC18,10μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇:水=50:100(v/v)
流速:0.8mL/min
进样:20μL
结果:所有组分70min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为皮质醇保留时间15.8min,峰2为β-Methasone 保留时间20.0min,峰3为四氢皮质酮保留时间22.5min,峰4为四反皮质醇保留时间32.5min,峰5为四氢-11-脱氧皮质醇保留时间 65.8min。
例3.植物甾醇分析(生物制药)
样品:含β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇和胆固醇的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:Alltech2000型ELSD蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃,氮气流速1.6L/min
色谱柱:SupecolDiscoueryC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇
流速:1mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在19min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为菜籽甾醇保留时间13.70min,峰2为胆固醇保留时间 14.62min,峰3为豆甾醇保留时间15.45min,峰4为菜油甾醇保留时间15.97min,峰5为β-谷甾醇保留时间17.05min。
例4.胆固醇分析
样品:含胆固醇等6组分的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:ELSD美国AlltechMKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为65℃,氮气流速为2.0L/min。
色谱柱:AllsphereSilica,3μm,柱长10cm,柱径4.6mm
流动相:A为离子对试剂,B为正己烷,C为水
梯度:时间0min7min15min
A58%52%52%
B40%40%40%
C2%8%8%
流速:1.25mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在13min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为胆固醇,峰2为棕榈酸,峰3为磷脂酰乙醇胺,峰4为磷脂酰丝氨酸,峰5为磷脂酰胆碱,峰6为神经鞘磷脂。
例5.磷脂分析(生物)
样品:含磷脂酰肌醇等4种物质混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站
检测器:500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为120℃,氮气流速为2.7L/min。
色谱柱:RosilNH2,5μm,柱长15cm,柱径4.6mm
流动相:A为无水乙醇,B为0.2mol/L的草酸溶液
梯度:时间0min15min30min30.1min35.1min
A95%85%85%95%95%
B5%15%15%5%5%
流速:1.5mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在35min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为磷脂酰乙醇胺,峰2为磷脂酰丝氨酸,峰3为磷脂酰胆碱,峰4 为磷脂酰肌醇。
例6.维生素分析(食品分析)
样品:含维生素A等5种物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有工作站
检测器:500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃,氮气流速为2.0L/min
色谱柱:AdsorbosphereC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇:乙醇=97:3
流速:1mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在21min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为维生素A,峰2为维生素D2,峰3为维生素D3,峰4为维生素E,峰5为维生素K1。
例7.抗菌素分析(药物)
样品:含有红霉素等5种抗菌素的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器,Rheadyane77251进样阀,HP化学工作站
检测器:2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为95℃,氮气流速为2.0L/min
色谱柱:AlltimaTMC18,5μm,柱长15cm,柱径4.6mm
流动相:A为0.2%五氟丙酸,B为甲醇
梯度:时间0min5min
A/B55%/45%35%/65%
流速:1mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在6min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为红霉素,峰2为链霉素,峰3为托布霉素,峰4为阿米卡星,峰5 为新霉素。
例8.无活菌素分析(生物制药)
样品:含无活菌素等5种物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器,Rheadyane77251进样阀,HP化学工作站
检测器:2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为96℃,氮气流速为2.9L/min
色谱柱:AlltimaTMC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:THF:水=60:40
流速:1mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在20min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为无活菌素,峰2为单活菌素,峰3为二活菌素,峰4为三活菌素,峰5为四活菌素。
例9.多肽分析(生物)
样品:含G-Y等3种多肽物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:ELSD美国AlltechMKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为110℃,氮气流速为2.19L/min
色谱柱:AlltimaTMC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:0.05%TFA水溶液:乙腈=65:35
流速:0.6mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在5min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为G-Y,峰2为G-L-Y,峰3为K-D。
例10.非离子型去垢剂分析(化学化工)
样品:3种非离子型去垢剂物质的混合物
色谱仪:“南京科捷LC600”液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:2000型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为65℃,氮气流速为1.9L/min
色谱柱:AlltechEconosphereTMC18,5μm,柱长15cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇:水=90:10
流速:0.8mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在5min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为n-葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙,峰2为n-十二烷基-β- D-吡喃葡萄糖甙,峰3为n-辛葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙。
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